Аллерген e2 — эпителий собаки, IgE, ИФА

Когда применяется цитология Какую информацию может дать цитология Какая информация поможет ветеринару в лечении Как берется проба клеток Какие есть преимущества у цитологии Какие ограничения есть у цитологии Какой этап следует после цитологии

Цитология у животных — это метод морфологической диагностики, основанный на изучении микроскопическим методом клеток организма. В большинстве случаев цитологические исследования помогают определить наличие или отсутствие злокачественных образований, характер опухолевого процесса. Но также путем цитологических исследований можно оценить характер патологического процесса, оценить состояние внутренних органов, исследовать естественные физиологические и аномальные жидкости.

Когда применяется цитология

Цитологическое исследование рекомендуется проводить при подозрении на опухолевые процессы — любое новообразование может быть как доброкачественным, так и злокачественным, что значительно влияет на план дальнейшей терапии и прогноз. Также проводится цитология при исследовании кист, при обнаружении выпотов. У животных могут исследоваться различные мазки, например, при отитах, чтобы определить, что является причиной воспаления (бактерии и какого типа, грибки — от этого зависит выбор препаратов для лечения). Цитология влагалищного мазка применяется для определения оптимального времени вязки.

Методика проведения анализа

Наиболее часто используемая для проведения цитологического анализа техника отбора проб ― соскоб кожи, а если речь идет об образце ткани из расположенного в коже новообразования или папулы ― тонкоигольная аспирация.

Для получения соскоба кожи необходимы: стерильный одноразовый скальпель или кюретка (хирургический инструмент в виде ложки или кольца с острыми краями), микроскоп с предметными стеклами и минеральное масло (биологически нейтральная жидкость, полученная из нефти) для смачивания скальпеля или кюретки.

Поверхностный соскоб кожи проводится без анестезии, перед проведением глубокого соскоба кожи у собаки ветеринар может обработать нужный участок кожи местным обезболивающим, чаще всего для этого применяют хлорэтил в аэрозоле, на несколько минут «замораживающий» ткани дермы.

При проведении глубокого соскоба скальпель или кюретка вводятся в кожу до появления крови из поверхностных капилляров. После этого полученный материал вместе с каплей минерального масла наносится на предметное стекло и накрывается покровным стеклом. Материал визуально исследуется под микроскопом с использованием сначала малого, стократного, а затем большого, тысячекратного увеличения.

В некоторых случаях при проведении цитоскопии требуется фиксация образца на предметном стекле спиртом или формалином. Для обнаружения клеточных элементов с неправильной структурой применяется окрашивание образца специальными красителями, которые служат маркерами атипичных клеток. Окрашивание по методу Папаниколау позволяет выявить наличие злокачественных клеток и вирусов, окрашивание по Романовскому эффективно при обнаружении бактерий и грибков.

При изучении биоматериала оценивается, насколько соответствуют норме структура клеток, их форма. Изучаются особенности цитоплазмы, изменения ядра, наличие или отсутствие аномальных включений. Выявленные отклонения от нормы лаборант документально фиксирует в специальном бланке.

Расшифровку цитологического анализа проводит специалист ― все данные занесены в бланк заключения в виде аббревиатуры системы Бетесда, общепринятой в медицинской терминологии, и понятной только врачам.

Преимущество методики цитологического исследования кожи у собаки в том, что проведение тестового анализа не занимает много времени, а его результаты либо дают информацию, необходимую для постановки точного диагноза, либо четко указывают направление дальнейшего диагностического поиска. Цитология также эффективна как метод промежуточной оценки результатов лечения.

Какую информацию может дать цитология

Цитология — это наука о клетке. При любом цитологическом исследовании мы можем видеть в микроскоп клетки исследуемой жидкости или мазка.

При цитологии крови можно увидеть в ней опухолевые клетки (при некоторых видах онкологии), можно обнаружить кровепаразитов (бабезии, дирофилярии). Даже входящая в большинстве случаев в обычный клинический анализ крови лейкограмма — это по сути своей цитология мазка крови, в котором подсчитывается количество разных клеток крови, что позволяет определить, есть ли в организме воспалительный процесс, заподозрить нарушение работы органов кроветворения, наличие аутоимунных реакций.

При проведении цитологии мочи можно получить информацию о количестве и типу мочевых кристаллов, которые образуют уролиты. Также в моче могут встречаться клетки эпителия мочевыводящих путей или даже почек, что говорит о необходимости дальнейшей диагностики мочевыделительной системы.

При проведении цитологии выпотов можно узнать, является ли он стерильным или там есть бактерии, могут быть опухолевые клетки — все это позволяет поставить диагноз или определить направление дальнейшей диагностики питомца.

Цитология может браться и с поверхности кожи — часто дерматологи делают мазки-отпечатки и смотрят, какие клетки там обнаруживаются, нет ли накожных и внутрикожных паразитов. При диагностике отитов мазок проводится обязательно — отит может быть бактериальной природы, вызываться грибком (обычно такие отиты вторичны) или начинаться из-за воздействия паразитов (например, отодексов).

Какие бывают виды биопсий

Исходя из конкретного способа получения образцов тканей для дальнейшего анализа, выделяют несколько основных видов биопсии у собак: пункционную, инцизионную, эксцизионную и трепанобиопсию. Каждый из них имеет свои индивидуальные особенности, позволяющие определить наилучшее место применения.

Пункционная

Пункционная разновидность предусматривает взятие биоматериала в виде частей отдельных тканей, с помощью прокола иглой кожного и мышечного слоёв. Она эффективна для забора материала из любого внутреннего органа, поэтому часто применяется при обследовании печени, почек, предстательной, щитовидной и поджелудочной железы. Исходя из конкретного места применения, выбирается наиболее подходящий тип игл:

• аспирационные, представленные в виде тонкостенных канюлей с кончиками, заточенными под разными углами (эффективны для прицельной тонкоигольной биопсии при цитологическом исследовании тканей);
• модифицированные аспирационные, отличающиеся от предыдущего варианта разной формой кончика (могут использоваться для получения как цитологических, так и гистологических образцов);
• режущие, которые задействуются только в гистологических исследованиях.

Методика проведения биопсии и точность результатов зависят от типа применяемого инструмента, но чаще всего достоверность полученных данных оценивается в пределах 93–95%, что сопоставимо с обычным гистологическим исследованием после классического хирургического вмешательства

Инцизионная

Инцизионная биопсия предусматривает забор только определённой части тканей патологически изменённого органа. Пункционная биопсия часто расценивается как разновидность инцизионной, поскольку через прокол также можно получить требуемый образец.

В классическом варианте проведения процедуры, скальпелем иссекается лишь участок опухоли, после чего её отправляют на детальное лабораторное исследование. На основании полученных результатов принимается решение об уместности иссечения всей оставшейся части новообразования.

Знаете ли вы? Самая древняя порода собак в мире — салюки. Первые изображения таких питомцев появились предположительно 5500 лет назад.

Эксцизионная

Этот вариант биопсии во многом напоминает предыдущий, разве что вместо части опухоли резекции подлежит весь патологически изменённый узел или новообразование. Обычно это не только диагностическая, но и лечебная процедура, правда, только в том случае, когда удаётся полностью избавиться от проблемы. К примеру, если раковая опухоль располагается лишь в одной почке и ещё не успела пустить метастазы в другие органы, для подтверждения её злокачественности, помимо компьютерной томографии, назначается и биопсия.

Если же после удаления и лабораторного изучения новообразования оно окажется доброкачественным, дальнейшее лечение не потребуется и проблему можно считать решённой. В тех ситуациях, когда опухоль уже успела хорошо «укорениться», обычно применяются другие разновидности биопсии, не связанные с классическим хирургическим вмешательством.

Трепанобиопсия

Трепанобиопсия применяется исключительно в случаях проблем со спинным мозгом, когда для подтверждения диагноза врача требуется изъятие столбика материала. В дальнейшем проводится гистологическое исследование компактного губчатого костного вещества для получения информации о структуре костной ткани и архитектонике костного мозга: клеточного состава, соотношения кроветворной и жировой ткани, состояния кровеносных сосудов.

Основным показанием к проведению трепанобиопсии у собаки будут:

• цитопения неизвестного происхождения;
• ограниченность информации о костном мозге после проведения обычной пункции иглой для аспирационной биопсии.

В обоих случаях данный метод становится решающим этапом дифференциальной диагностики заболеваний, характеризующихся вторичным поражением костного мозга и кроветворной системы (например, хронических инфекционных недугов или эндокринных расстройств).

Когда необходимо проводить биопсию у собак

Изъятие биоматериала для подтверждения диагноза рекомендуется в тех случаях, когда неинвазивные методы диагностики исчерпали себя, так и не принеся ожидаемых результатов. Общими показаниями в данном случае будут следующие обстоятельства:

• появление в организме новообразований неопределённой природы;
• недуги, не поддающиеся стандартному терапевтическому влиянию;
• необходимость верификации диагноза и прогноза лечения болезни в случае его повышенной стоимости;
• необходимость в уточнении диагноза при подозрении на редкое и тяжёлое заболевание.

В последнем случае речь обычно идёт об эозинофильном гастрите, амилоидозе почек или других аутоиммунных недугах.

Какая информация поможет ветеринару в лечении

Цитология — один из очень важных методов диагностики. В зависимости от того, есть ли в крови бабезии, или нет, будет приниматься решение о терапии пироплазмоза и использовании препарата против этого вида паразитов. Если при исследовании мазка из уха у собаки не было обнаружено клещей — значит, причина отита в чем-то другом, лечение будет требоваться иное, и так далее.

Если жидкость, взятая из организма, стерильна — это подтверждает один диагноз, если в ней обнаружатся бактерии — это будет другой диагноз и другая схема лечения животного.

Что показывают исследования

Результаты проведённых исследований во многом зависят от конкретного места выполнения биопсии. Чаще всего таким способом определяют характер новообразований на коже, в кишечнике, состояние костного мозга, печени и почек. В зависимости от строения опухоли и особенностей здоровья питомца выбирается наиболее безопасный вид вмешательства.

Кожа

При проблемах с кожей прямыми показаниями к проведению описанной диагностической процедуры будут везикулярные недуги и появление язв, устойчивых к медикаментозному лечению. Перед процедурой в местах поражения, собаке выстригают шерсть, после чего под местной анестезией иссекают часть поверхности раны. Для большей достоверности полученных результатов стоит взять несколько образцов, не только из везикул, но и папул, булл и корочек подсохших чешуй.

Дифференциальный диагноз ставится на основании проведённых лабораторных исследований тканей и может подтвердить или опровергнуть наличие злокачественных/доброкачественных новообразований, разных видов микоза, аутоиммунных недугов, вроде пемфигоидного комплекса и мультиформной эритемы.

Кишечник

При проблемах с кишечником прямым показанием к проведению биопсии станет энтеропатия с потерей белка. Обычно в этих целях назначают диагностическую лапаротомию и поисковую биопсию в разных местах желудка, кишечника и лимфоузлов, правда, в последнем случае имеется высокий риск из-за гипопротеинемии. Эндоскопический вариант выполнения всех действий имеет меньшие риски, но и достоверность его результатов ниже.

Полученный дифференциальный диагноз обследования может указывать на наличие лимфосаркомы, аутоиммунных расстройств, лимфоцитарно-плазмоцитарного энтерита.

Важно! За 2-3 недели до процедуры нужно прекратить давать собаке кортикостероиды, иначе нельзя быть уверенным в достоверности полученных результатов.

Костный мозг

Биопсия костного мозга назначается при подозрениях ветеринара касательно нерегенеративной анемии, стойкой тромбоцитопении, панцитонемии. Подготовка животного к проведению процедуры заключается в лёгкой седации или применении местной анестезии, после чего собаку кладут грудью на стол и поджимают ей лапы. В большинстве случаев рекомендуется тонкоигольная аспирационная биопсия, но при плохом насыщении образца клетками может задействоваться трепан-биопсия. Прокол осуществляется в подвздошном гребне, а у мелких собак — во вертлужной впадине. Окончательным диагнозом после проведённого обследования может стать онкология костного мозга или миелодисплазия.

Как берется проба клеток

В зависимости от объекта, цитология которого проводится, будет выбираться и способ взятия пробы клеток. Для цитологии с кожи чаще всего используется мазок-отпечаток или скотч-тест. Могут браться более глубокие соскобы. Для сбора материала для цитологии влагалищного мазка может использовать обычная ватная палочка.

Кровь на мазок чаще всего берется из периферических капиллярных сосудов, например, из уха, венозная кровь здесь не нужна.

При необходимости взять образец клеток для цитологии новообразования оптимально использовать тонкоигольную биопсию — этот метод является малоинвазивным, практически не травмирует исследуемый орган и окружающие ткани.

При взятии выпота чаще всего диагностическую процедуру совмещают с лечебной — проводится аспирация жидкости, и оттуда уже берется проба для проведении цитологии.

Цитологические исследования

Жидкостная цитология Liquid Based Cytology (LBC) – «золотой стандарт» цитологических исследований.

На данный момент LBC является наиболее информативной технологией по сравнению с классической цитологией, в связи с высоким уровнем автоматизации и, следовательно, стандартизации процессов приготовления и окраски препаратов.
В современном мире LBC используется в диагностике патологических состояний различных органов и систем:

• Женской репродуктивной системы;
• Молочной железы;
• Щитовидной железы;
• Лимфатических узлов;
• Смывов и выпотов из брюшной/плевральной полостей;
• Образований кожи и подкожной клетчатки.

Основная область применения LBC- это диагностика предраковых поражений шейки матки.

Рак шейки матки является одним из наиболее распространенных злокачественных новообразований у женщин и в возрастной группе 35-45 лет лидирует среди причин смерти от онкологических заболеваний. Чрезвычайно эффективным и доступным методом скрининга предраковых состояний и рака шейки матки является цитологическое исследование.

Ограничения:

Услуга доступна только для медицинских организаций. Мы не проводим цитологические исследования для частных пациентов.

Преимущества жидкостной цитологии:

1. Улучшенное качество материала:

• в контейнер с фиксирующим раствором попадает весь полученный при заборе материал;
• минимизируется содержание слизи, элементов периферической крови, элементов воспаления, разрушенных клеток;
• клетки сохраняют как морфологические, так и молекулярно-биологические свойства.

2. Длительный срок хранения полученного биоматериала: использование виалы с фиксирующим раствором делает логистику образца более удобной и безопасной, а также позволяет добиться сохранности клеток в течение долгого времени при оптимальных условиях.

3. Быстрое и качественное приготовление стандартного монослойного препарата достигается использованием современного оборудования.

4. Из полученного биологического материала можно приготовить несколько цитологических препаратов.

5. Стандартизированные методики окрашивания.

Как известно, одним из главных недостатков традиционного цитологического исследования мазка с поверхности шейки матки является большая доля (до 20-40%) ложноотрицательных заключений, связанных с ошибками на преаналитическом этапе — при заборе материала, приготовлении препарата и окраске.

В лаборатории UNIM для проведения цитологических исследований используется новейшее оборудование:

• Цитологический процессор CellPrep Plus® производства Biodyne (Республика Корея) — полностью автоматическая система для подготовки монослойного препарата методом жидкостной цитологии с минимальным количеством операций, выполняемых вручную.
• Автоматический аппарат для окрашивания Leica ST5010 XL
• Цифровой сканер микропрепаратов Leica Aperio AT2 — для перевода цитологических стекол в цифровой формат.

Срок выполнения исследования:

Срок выполнения исследования составляет 3 дня, не считая дня доставки материала в лабораторию. При заказе комплекса, включающего анализ на ВПЧ, срок составляет 5 дней, не считая дня доставки материала в лабораторию.

Как заказать исследование?

По всем возникшим вопросам Вы можете проконсультироваться у нашего медицинского администратора по телефону: 8-800-555-92-67 или написать нам в любой мессенджер: Viber, WhatsApp: +7 925 740 05 87 или по электронной почте [email protected]

Также Вы можете обратиться к своему личному менеджеру, если Вы являетесь представителем компании-клиента лаборатории UNIM.

Пример заключения:

UNIM — первая в России полностью цифровая патоморфологическая лаборатория. Цитологические препараты “переводят в цифру”, после чего диагностическая команда исследует их на наличие атипичных клеток с использованием платформы Digital Pathology.

Цитопатологи UNIM — высококлассные специалисты, работающие по мировым стандартам с соблюдением принципа коллегиальности, в том числе с иностранными коллегами.

Посмотреть образец заключения можно здесь: Образец заключения ЖЦ

Виды исследований:

Какие есть преимущества у цитологии

Цитология достаточно быстрый в исполнении метод диагностики (в отличие, например, от гистологии). Она позволяет максимально быстро получить информацию, важную для назначения лечения.

В большинстве случаев для взятия проб клеток нет необходимости в седации животного, каких-то особых методах фиксации — мазок-отпечаток или взятие крови из уха практически безболезненны. Тонкоигольня биопсия может проводиться под седацией, чтобы обеспечить неподвижность пациента. Такое исследование чаще всего проводится под визуальным контролем — при помощи датчика УЗИ или эндоскопа, в некоторых случаях область взятия пробы локализуется при помощи рентгена.

В некоторых случаях без проведения цитологии корректное назначение дальнейшего лечения невозможно.

Какие ограничения есть у цитологии

Ограничения в проведении цитологии в основном касаются диагностики новообразований. Объем клеток, берущихся для цитологии, невелик, возможны случаи, когда опухолевые клетки могут туда просто не попасть или не получится получить полную картину, определить конкретный тип новообразования.

Так как цитология малоинвазивна, противопоказаний немного, однако если у животного есть нарушения свертываемости крови, а врачу необходимо провести биопсию опухоли печени или почек — процедуру рекомендуется проводить в операционной под контролем хирурга, чтобы при необходимости остановить кровотечение. В абсолютном большинстве случаев тонкая игла не будет вызывать кровотечений.

Видео о цитологии у животных — интервью с руководителем диагностической лаборатории:

Какой этап следует после цитологии

При диагностике опухолей после хирургического удаления новообразования и цитологии должна проводиться гистология. В некоторых случаях при обнаружении злокачественных опухолей может потребоваться иммуногистохимия для подбора наиболее подходящей химиотерапии.

Для всех других видов цитологии после проведения анализа подтверждается диагноз или направление для дальнейшей диагностики, и назначается лечение.
(с) Ветеринарный центр лечения и реабилитации животных «Зоостатус». Варшавское шоссе, 125 стр.1. тел.